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色譜級環己烷:嬰幼兒配方食品和乳粉維生素K1的測定

發布時間:2021-02-24

色譜級環己烷彪仕奇收集了方法概要:在嬰幼兒配方食品和乳粉中加入適量的脂酶,酶解后用NaOH 皂化,用正己烷萃取,蒸干后用正己烷溶解,用高效液相色譜柱后衍生法(HPLC-鋅粉還原柱)用熒光檢測器定量測定維生素K1。

關鍵詞:嬰幼兒配方食品,乳粉,HPLC,鋅粉還原柱

方法步驟:

1、試劑和耗材

HPLC級正己烷;無水硫酸鈉;

HPLC級甲醇;HPLC 級冰醋酸(乙酸);HPLC級二氯甲烷;維生素K1 標準品。

2、提取

稱取約2.5 g(精確到0.1mg)混合均勻的試樣于三角瓶中(含淀粉的試樣加入0.5g 淀粉酶),用30ml 溫水溶解,加入1g 酯酶,于37℃恒溫空氣震蕩器中震蕩過夜,使其充分酶解。然后加入2ml 10mol/L氫氧化鈉溶液,轉移至500ml 的分液漏斗中,加入50ml 乙醇,充分混勻。再加入50ml 正己烷,加塞振搖2min,靜置分層。放出下層于另一個500ml 分液漏斗中再次加入50ml 正己烷萃取,靜置分層,棄去水相,合并正己烷。加入適量蒸餾水洗有機相兩次,棄取水相,將正己烷通過無水硫酸鈉過濾到500ml 的平底燒瓶中,在旋轉蒸發器上40℃下蒸發至近干,用正己烷轉移殘留物到10ml 指形瓶中,用氮氣吹干,準確加入1ml 正己烷,充分振蕩溶解殘留物,得到待測液,在冰箱中冷凍一小時后備用。

3、 HPLC 測定方法:

色譜柱、衍生柱:鋅粉還原柱,35×4.6mm(LAAA-0001)

流動相:甲醇900ml,二氯甲烷100ml,冰醋酸0.3 ml,氯化鋅1.5g,無水乙酸鈉0.5g,溶解過0.45濾膜。

進樣量:10 μL 

流 速:1.0 mL/min 

檢測波長:熒光檢測器:波長EX=243nm EM=430nm

4、結果分析:

分析圖譜 

VK1 標準溶液色譜圖(熒光檢測器)0.4ug/ml VK1 標準溶液色譜圖(熒光檢測器)0.04ug/ml 

嬰幼兒配方色譜圖(熒光檢測器) 

5、結果分析 

兒配方食品中的維生素K1,分離效果良好,峰形對稱,重復性好。

色譜級環己烷彪仕奇致力于為客戶提供一流的產品和技術服務,推進企業的循環發展!

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