甲醇哪家好？彪仕奇告訴您實(shí)驗(yàn)里常用的乙腈和甲醇在色譜分析中的區(qū)別，乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)是在反向色譜柱方法開(kāi)發(fā)中廣泛使用的兩種常見(jiàn)溶劑。所以，除了知道乙腈比甲醇有更高的洗脫能力這一事實(shí)外，色譜分析人員還應(yīng)該知道其他的特性嗎?讓我們來(lái)討論一些所有色譜專(zhuān)家都應(yīng)該知道的問(wèn)題。
紫外線(xiàn)吸光度
對(duì)于HPLC級(jí)溶劑(我們?cè)贖PLC分析中應(yīng)始終使用HPLC級(jí)溶液)，乙腈的吸光度在這兩種溶劑中最低，非常適合低紫外光分析。甲醇在205-210nm左右有較高的紫外光吸收值，在非常低的紫外光范圍內(nèi)略有限制。
溶劑溶解性
乙腈和甲醇在溶解多種緩沖鹽和樣品的能力上存在顯著差異。這些差異在方法開(kāi)發(fā)中至關(guān)重要。
1.流動(dòng)相溶解度
梯度運(yùn)行顯示低重現(xiàn)性或失敗的一個(gè)常見(jiàn)原因可能與運(yùn)行高濃度緩沖液和高濃度有機(jī)溶液有關(guān)。而含有濃度小于10mM鹽溶液的水溶液/有機(jī)溶液在大多數(shù)梯度條件下不太可能沉淀（最多98%是有機(jī)溶劑，而不是100%)，大多數(shù)與高效液相色譜應(yīng)用一起使用的緩沖溶液會(huì)有更高的鹽濃度，當(dāng)分析條件中有機(jī)溶劑含量較高時(shí)可能會(huì)從溶液中析出（導(dǎo)致堵塞，泄漏，插頭和不準(zhǔn)確的結(jié)果）。在反向色譜法中選擇有機(jī)組成時(shí)要謹(jǐn)慎。確保使用的溶液在所有濃度下都是穩(wěn)定的。還要驗(yàn)證緩沖能力是否仍然存在，當(dāng)使用高有機(jī)濃度時(shí)(當(dāng)緩沖液被稀釋時(shí))。
甲醇總體上具有更好的溶解度特性(優(yōu)于乙腈)，這意味著它在較高濃度下能更好地溶解大多數(shù)鹽，從而獲得更好的性能和更少的沉淀。
2.樣品的溶解度(對(duì)峰形和保留的影響)
液相色譜的一個(gè)基本要求是樣品完全溶解在流動(dòng)相(初始流動(dòng)相)中。在分析前，將樣品溶解在流動(dòng)相或強(qiáng)度稍弱的溶液（不是更強(qiáng)的溶液）。這確保它將作為一個(gè)集中的段塞加載到柱的頂部，以改善峰形和RSD。如果樣品沒(méi)有完全溶解在流動(dòng)相，那么你實(shí)際上并沒(méi)有分析整個(gè)樣品。甲醇優(yōu)于乙腈的另一個(gè)方面是它能完全溶解更多類(lèi)型的樣品。這一改進(jìn)的溶解度可能導(dǎo)致更好的整體峰形。甲醇的選擇性也不同于乙腈(不僅僅是洗脫強(qiáng)度)，這可能導(dǎo)致峰洗脫時(shí)間與預(yù)期的保留時(shí)間不同。這也是為什么在開(kāi)發(fā)反向方法時(shí)，我們總是嘗試使用含有乙腈或甲醇的不同流動(dòng)相混合物的另一個(gè)原因。
背壓
乙腈的粘性比甲醇小，因此通常會(huì)導(dǎo)致整體柱壓和系統(tǒng)背壓降低。乙腈和水的混合物也會(huì)發(fā)生吸熱反應(yīng)(冷卻溶液)，從而在溶液中捕獲氣體。如果你預(yù)先混合你的流動(dòng)相，讓它靜置幾分鐘后在制備。
希望這篇關(guān)于這兩種常用高效液相色譜溶劑的差異的簡(jiǎn)短討論將有助于您開(kāi)發(fā)出更好的高效液相色譜和LC-MS方法。
