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色譜級石油醚:高效液相色譜中溶劑效應理論

發布時間:2021-01-06

高效液相色譜是有機分析,特別是藥物分析的重要手段。而色譜峰峰形影響著化合物的定量和定性。在影響色譜峰峰形的諸多因素中,“溶劑效應”經常被忽視。色譜級石油醚彪仕奇對高效液相色譜中“溶劑效應”的漫談。

高效液相色譜已經廣泛應用于有機分析,特別是藥物分析工作中。分析工作者通常將更多精力集中在流動相和儀器方法的選擇上,忽視了溶解樣品所用溶劑的重要性。高效液相色譜進樣之前,必須選擇一種合適的溶劑溶解樣品。如果溶劑選擇不當則會產生“溶劑效應”,使分析工作者在定性和定量分析中產生誤判,影響分析結果。因此,了解“溶劑效應”產生的原因及掌握避免“溶劑效應”的基本方法對分析工作者是十分必要的。

溶劑效應的概念溶劑效應亦稱“溶劑化作用”。指液相反應中,溶劑的物理和化學性質影響反應平衡和反應速度的效應。可能造成色譜峰展寬、分叉、保留時間漂移、峰面積變化,雙峰等現象。與此同時,較早洗脫的峰出現前沿或分叉,較晚洗脫的峰峰形正常溶劑效應產生的原因樣品進入高效液相色譜中,當溶劑與流動相存在差異時,一部分樣品溶解進入了流動相,一部分還留在溶劑里,造成色譜保留的差異。

在反相色譜系統中溶劑強度的順序為水(最弱)<甲醇<乙腈<乙醇<四氫呋喃<丙醇<二氯甲烷(最強)。溶解樣品的溶劑強度大于該樣品出峰時流動相強度,樣品溶劑可以看成流動相的一部分,一部分樣品溶解于溶劑中會被迅速洗脫出色譜柱,而一部分樣品溶解于流動相,被流動相洗脫出,這樣會造成色譜峰的展寬或者分叉

進樣體積造成的溶劑效應是一般與溶劑種類有關的。流動相作為溶劑時,增加進樣體積后,目標分析物色譜峰不會發生遷移,保留時間基本穩定。使用強度大于該樣品出峰時流動相強度的溶劑,增加進樣體積后,目標分析物色譜峰會向前遷移,直至裂分,并且峰高變小峰寬變大。這是因為進樣體積較小時,擴散至流動相的目標分析物占絕大多數,除了保留時間略微提前,峰形以及峰寬與流動相溶解時基本一致。體積增大到一定程度,擴散至流動相氛圍的目標物與留在溶劑氛圍的目標物在數量上相當時,色譜峰分叉明顯。當樣品體積進一步增大,絕大多數目標物進入色譜柱時是溶解在溶劑中的,目標分析物的色譜峰已經明顯向前遷移了。

其實在色譜柱中的流動相只有50%是動態,其余50%在死體積、載體間隙處于靜止狀態。溶質被固定相吸附先通過50%的“靜止區”,若溶劑及流動相不兼容,則影響溶質在溶劑與流動相之間的傳遞,從而影響被固定相吸附而導致峰形變差。

以上是色譜級石油醚彪仕奇結合相關資料總結的高效液相色譜使用中“溶劑效應”相關觀點,未盡全面。不足之處還請諒解!


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